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    中文名：人血紅素氧合酶1（HO-1）ELISA試劑盒

    別名：人血紅素氧合酶1（HO-1）ELISA Kit

    供貨商：上海遠慕

    產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T

    樣本體積： 50-100ul

    保存條件： 2-8℃下，可放置6個月。

    檢測樣本： 血清、血漿細胞上清液、灌洗液。

    特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應

    特點：靈敏性高、特異性強、重復性好

    種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等

    引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：①標本因素；②試劑因素；③操作因素。

    ELISA試劑盒包含以下各組分：

    （1）結(jié)合物及標本的稀釋液；

    （2）洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；

    （3）酶標記的抗原或抗體（結(jié)合物）；

    （4）酶的底物；

    （5）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），ELISA試劑盒參考標準品和控制血清（定量測定中）；

    （6）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；

    人血紅素氧合酶1（HO-1）ELISA試劑盒應用范圍：

    ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本，因此，也適合于血清流行病學調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。

    操作注意事項：

    1.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

    2.試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

    3.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

    4.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

    5.洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

    6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

    7.加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

    8.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

    9.底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

    人ELISA試劑盒性能：

    1.準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

    2.靈敏度：zui低檢測濃度小于10pg/ml。

    3.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。

    4.重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

    標本要求：

    1.血清：

    室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

    2.血漿：

    應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。

    3.尿液：

    用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

    4.細胞培養(yǎng)上清：

    檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。

    5.培養(yǎng)細胞：

    檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

    6.組織標本：

    切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑， 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

    7.標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

    8.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

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