血漿游離血紅蛋白測定方法
點擊次數:1316 更新時間:2016-06-27
分析:血漿游離血紅蛋白測定方法
ELISA試劑盒實驗原理
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態氧,使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化,由無色zui終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。
實驗方法
材料:
1.2g/L鄰甲聯苯胺溶液
2.1%H2O2
3.10%醋酸溶液
4.分光光度計
方法:
1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。
3.計算公式
血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100
實驗結果計算
參考范圍:0-40mg/L
注意事項
1.一切容器避免血紅蛋白污染;
2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;
3.鄰聯苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確
ELISA試劑盒實驗原理
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態氧,使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化,由無色zui終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。
實驗方法
材料:
1.2g/L鄰甲聯苯胺溶液
2.1%H2O2
3.10%醋酸溶液
4.分光光度計
方法:
1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。
試劑 (ml) | 測定管 | 空白管 |
2 g/L鄰甲聯苯胺溶液 | 0.5 | 0.5 |
患者血漿 | 0.02 | / |
1% H2O2 | 0.5 | 0.5 |
混勻后室溫放置10min | ||
10%醋酸溶液 | 5.0 | 5.0 |
室溫放置10min |
3.計算公式
血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100
實驗結果計算
參考范圍:0-40mg/L
注意事項
1.一切容器避免血紅蛋白污染;
2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;
3.鄰聯苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確