關于標準綿羊血清的五大問題
點擊次數:1611 更新時間:2015-10-09
問題一:如何保管標準綿羊血清
對于準綿羊血清的保存,小編建議長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。
問題二:如何解凍標準綿羊血清
標準綿羊血清需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。
問題三:如何處置血清凍結后的絮狀沉積物
當血清凍結后出現了絮狀沉積物,我們應該仔細分析出現這種現象的原因,一般來說,zui通常的原因就是血清中脂蛋白的變性構成的,而血纖維蛋白(構成凝血的蛋白之一)在血清凍結后,也會存在于血清中,亦是構成血清沉積物的主要緣由之一。想要去除血清凍結后的絮狀沉積物,我們可以將血清分裝至無菌離心管中,以400g略微離心,上清液即可接著參加培育基內一同過濾。
問題四:如何防止絮狀沉積物出現
防止絮狀沉積物出現的方法就是注重正確的血清凍結進程,并盡量防止滅活血清及長時刻的將血清置于高溫環境中。
問題五:為什么要做熱滅活
熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清,加熱過程中須規則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多。
試驗顯現,通過正確處置的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需求的。通過處置的血清對細胞成長只要細小的推進,或*沒有任何效果,乃至一般由于高溫處置影響了血清的質量,而構成細胞成長速率的下降。而通過熱處置的血清,沉積物的構成會明顯的增多,這些沉積物在倒置顯微鏡下調查,像是“小黑點”,常常會讓研討者誤以為是血清遭受污染,而把標準綿羊血清放在3 7℃環境中,又會使此沉積物更增多,使研討者認為是微生物的割裂擴增。